CHARACTERIZATION AND CELULAR PROLIFERATION OF OVARIAN STRUCTURES OF EWES BY THE TECHNIQUE OF AGNOR: OVARIAN MORFOMETRY AND CORRELATIONS

M. G. M. Chacur; T. A. H. Arrebola; D. B. Ibrahim; O. C. Sanches; L. R. A. Gabriel Filho; C. P. Cremasco; F. F. Putti

doi:10.18011/bioeng2015v9n3p209-220

Authors

M. G. M. Chacur
T. A. H. Arrebola
D. B. Ibrahim
O. C. Sanches
L. R. A. Gabriel Filho
C. P. Cremasco
F. F. Putti

DOI:

https://doi.org/10.18011/bioeng2015v9n3p209-220

Keywords:

ovis aries, ovarian anatomy, celular proliferation, argyrophilic protein

Abstract

The AgNOR staining technique for nucleolar organizer regions (NORs) is characterized by marking proteins related to ribossomal ribonucleic acid evaluating celular proliferation. The objective was to study the ovarian morphometry and the value of AgNOR thecnique application to evaluate the proliferation of healthy cels from ovarian structures in crossbred ewe. 102 pairs of ovaries were collected and from the largest follicle of each ovary was measured its diameter. From the largest corpus luteum (CL) was measured the diameter and width, classifying the CL in: included, protruberant, massive and cavity, followed by AgNOR staining. The significance level was 5%. It had difference (p<0.05) for the diameter of the largest follicle between right (RO): 4.2±2,3mm and left (LO): 3.6±2,2mm sides. There was a correlation (p<0.01) between the NORs of internal theca (IT) and external theca (ET): RO (0.46) and LO (0.61); NORs of granulosa and IT: RO (0.54) and LO (0.59); and NORs of granulosa and ET: RO (0.34) and LO (0.38). Was conclude that the NORs quantification was appropriate to study the determination of the potential for ovarian structures proliferation, which was similar for right and left sides.

Downloads

Download data is not yet available.

References

ANUÁRIO DA PECUÁRIA BRASILEIRA - Anualpec. São Paulo: AgraFNP, 2014. p.273.

BLAIR, H. T.; VAN DER LINDEN, D. S.; JENKINSON, C. M. C.; MORRIS, S. T.; MACKENZIE, D. D. S.; PETERSON, S. W.; FIRTH, E. C.; KENYON, P. R. Do ewe size and nutrition during pregnancy affect foetus and foetal organ weight in twins? Livestock Science, Amesterdan, v. 142, n.1-3, p. 99–107, 2011.

BOUCHE, R.; DERKIMBA, A.; CASABIANCA, F.. New trends for innovation in the Mediterranean animal production. Springer Science & Business Media, 2011.

CASIDA, L.E.; WOODY, C.O.; POPE, A.L. Inequality in functin of the right and left ovaries and uterine horns of the ewe. Journal of Animal Science, Champaign, v. 25, n. 4, p.1169-1171, 1966.

CASTILHO, C.; ALMEIDA, M. F.; COSTA, M. Z.; CESARE, A. G.; GABRIEL FILHO, L. R. A. Protocolos de indução e sincronização do estro em ovelhas. Ciência Animal Brasileira, Goiânia, v. 14, n. 1, p. 91-97, 2013.

CASTILHO, C.; ALMEIDA, M. F.; GIOMETTI, I. C.; COSTA, M. Z.; GABRIEL FILHO, L. R. A.; CESARE, A. G. Use of estradiol benzoate to induce ovulation in a short-term protocol for fixed-time AI in sheep. Semina Ciências Agrárias, Londrina, v. 36, n. 3, p. 1419-1424, 2015.

CHACUR, M. G. M.; VALENTIM, N. C.; MARTINEZ, A. I. S. ; TOSTES, R. A.; KRONKA, S. N. Morfometria de ovários de fêmeas zebu Bos taurus indicus coletados em matadouro. Acta Scientiae Veterinariae, Porto Alegre, v. 34, n. 1, p. 65-70, 2006.

CHACUR, M. G. M.; MIZUSAKI, K. T.; SANTOS, F. H.; CESARE, A. G.; GABRIEL FILHO, L. R. A.; OBA, E.; RAMOS, A. A. Influência da estação do ano nas características do sêmen e na concentração de hormônios em touros Nelore e Simental. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 64, n. 3, p. 540-546, 2012.

CHACUR, M. G. M.; MIZUSAKI, K. T.; GABRIEL FILHO, L. R. A., OBA, E.; RAMOS, A. A. Seasonal Effects on Semen and Testosterone in Zebu and Taurine Bulls. Acta Scientiae Veterinariae, Porto Alegre, v. 41, p. 1-4, 2013.

CHACUR, M. G. M.; MARTINS, E. A. F.; SILVA, A. A.; GUABERTO, L. M.; GABRIEL FILHO, L. R. A.; SANCHES, O. C.; OBA, E. Morfometria corpórea, características do sêmen, proteínas seminais e testosterona em cervos Cervus unicolor, em cativeiro. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v.66, n.5, p.1392-1400, 2014.

CREMASCO, C. P., GABRIEL FILHO, L. R. A., GABRIEL, L. R. A. Bioestatística e suas Aplicações. Adamantina: Editora Espaço Cultural do Brasil, 2009, v.1, p.198.

CRESTA, F. B.; ALVES, M. R. Avaliação da cinética do epitélio corneano com marcadores de proliferação celular. Arquivos Brasileiros de Oftalmologia, São Paulo, v. 70, n. 6, p. 953-960, 2007.

CROCKER, J.; BOLDY, D. A. R.; EGAN, M. J. How should we count AgNORs? Proposals for a standardized approach. The Journal of Pathology, Londres, v. 158, p. 185-188, 1989.

FIERRO, S.; GIL, J.; VIÑOLES, C.; MUZANTE, J. O. The use of prostaglandins in controlling estrous cycle of the ewe: A review. Theriogenology, Milão, v. 79, n. 3, p. 399-408, 2013.

FIGUEIREDO, J. R.; RODRIGUES, A. P. R.; AMORIM, C. A.; SILVA J. R. V. Manipulação dos Oócitos Inclusos em Folículos Ovarianos Pré-antrais. In: GONÇALVES, P. B. D.; FIGUEIREDO, J. R.; FREITAS, V. J. F. Biotécnicas Aplicadas à Reprodução Animal, 2.ed. São Paulo: ROCA, 2008. p.303-328.

FITZ, T. A.; MAYAN, M. H.; SAWYER, H. R. NISWENDER, G. D. Characterization of Two Steroidogenic Cell Types in the Ovine Corpus Luteum. Biology of Reproduction, Madison, n. 27, n. 3, p. 703-711, 1982.

GABRIEL FILHO, L. R. A.; CREMASCO, C. P.; PUTTI, F. F.; CHACUR, M. G. M. Application of fuzzy logic for the evaluation of livestock slaughtering. Engenharia Agrícola, Jaboticabal, v. 31, n. 4, p. 813-825, 2011.

GRAZUL-BILSKA, A. T.; BOROWICZ, P. P.; REYNOLDS, L. P.; REDMER, D. A. Vascular perfusion with fluorescent labeled lectin to study ovarian functions. Acta Histochemica, Amsterdam, v. 115, n. 8, p. 893-898, 2013.

HAFEZ, B.; HAFEZ, E. S. E. Anatomia da Reprodução Feminina. In: HAFEZ, E. S. E.; HAFEZ, B. Reprodução Animal, 7.ed. São Paulo: Manole, 2004. p.13-30.

HASHEM, N. M.; SALLAM, S. M. A. Sexual and ovarian activity of crossbred ewes fed different types of roughage during seasonal anestrus. Small Ruminant Research, Amsterdam, v.107, n. 2, p.136-140, 2012.

HASTIE, P. M.; HARESIGN, W. Modulating peripheral gonadotrophin levels affects follicular expression of mRNAs encoding insulin-like growth factor binding proteins in sheep. Animal Reproduction Science, Amsterdam, v. 119, n. 3, p. 198-204, 2010.

HEMAMALINI, N. C.; RAO, B. S.; TAMILMANI, G. ; AMARNATH, D.; VAGDEVI, R. ; NAIDU, K. S. ; REDDY, K. K. ; RAO, V. H. Influence of transforming growth factor-α, insulin-like growth factor-II, epidermal growth factor or follicle stimulating hormone on in vitro development of pre antral follicles in sheep. Small Ruminant Research, Amsterdam, v. 50, n. 1-2, p. 11-22, 2003.

IHAKA, R.; GENTLEMAN, R. R: A language for data analysis and graphics. Journal of Computational and Graphical Statistics, Auckland, v. 5, n. 6, p. 299-314, 1996.

LAGARAINE, C.; SKIPORE, J.; SZCZEPKOWSKA, A.; DUFOURNY, L.; THIERY, J. C. Tight junction proteins vary in the choroid plexus of ewes according to photoperiod. Brain Research. Amsterdam. v. 1393, n. 6, p. 44 - 51, 2011.

LETELIER, C. A.; CONTRERAS-SOLIS I.; GARCÍA-FERNÁNDEZC, R. A.; SÁNCHEZ, M. A.; GARCÍA-PALENCIA, P.; SÁNCHEZ, B.; ARIZNAVARRETA, C.; TRESGUERRES, J. A. F.; FLORES, J. M.; GONZALEZ-BULNES, A. Effects of oestrus induction with progestagens or prostaglandina analogues on ovarian and pituitary function in sheep. Animal Reproduction Science, Amsterdam, v. 126, n. 6, p. 61-69, 2011.

LINDNER, L. E. Improvements in the Silver-staining Technique for Nucleolar Organizer Regions (AgNOR). Journal of Histochemistry & Cytochemistry, Copenhagen, v. 41, n. 3, p. 439-445, 1993.

LÖHR, C. V., TEIFKE, J. P., FAILING, K. WEISS, E. Characterization of the proliferation state in canine mammary tumors by the standardized AgNOR method with postfixation and immunohistologic of Ki-67 and PCNA. Veterinary Pathology Online, Ontário, v. 34, n. 3, p. 212-221, 1997.

MOAKHAR, H. K.; KOHRAM, H.; SALEHI, R.; SHAHNEH, A. Z. Follicular and ovulatory responses of the right versus left ovaries to eCG treatment in Shall Iranian ewes. African Journal of Biotechnology, Bowie, v. 9, n. 10, p. 1523-1527, 2010.

MURRAY, A. W. Recycling the Cell Cycle: Cyclings Revisited. Cell, Amsterdam, v. 116, p. 221-234, 2004.

PICH, A.; CHIUSA, L.; MARGARIA, E. Prognostic relevance of AgNORS in tumor pathology. Micron, Amsterdam, v. 31, n. 2, p. 133-141, 2000.

PLOTON, D.; MENAGER, M.; JEANNESSON, P.; HIMBER, G.; PIGEON, F.; ADNET, J. J. Improvement in the staining and in the visualization of the argyrophilic proteins of the nuclear organizer regions at the optical level. The Histochemical Journal, Brisbane, v.18, n.1, p. 5-14, 1986.

RIVERA, O. E.; VARAYOUD, J.; RODRÍGUEZ, H. A.; MUNOZ-DE-TORO, M.; LUQUE, E. H. Neonatal exposure to bisphenol A or diethylstilbestrol alters the ovarian

follicular dynamics in the lamb. Reproductive Toxicology, Amsterdam, v. 32, n. 3, p. 304-312, 2012.

RODRIGUES, P. A.; COELHO, L. A.; NONAKA, K. O. SASA, A., VICENTE, W. R. R., BALIEIRO, J. C. D. C.; SIQUEIRA, E. R. D. Annual characteristics of estrous activity in wool and hair ewe lambs under subtropical conditions. Scientia Agricola, Piracicaba, v.64, n.5, p.468-475, 2007.

ROSA, H. J. D.; BRYANT, M. J. Seasonality of reproduction in sheep. Small Ruminant Research, Amsterdam, v. 48, n. 3, p. 155-171, 2003.

SANCHES, O. C. Quantificação dos mastócitos nas neoplasias mamárias malignas de cadelas: análise histopatológica, histoquímica e imunoistoquímica. 2010. 83f. Tese (Doutorado em Medicina Veterinária) - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Botucatu.

SASA, A.; TESTON, D.C.; RODRIGUES, P. A.; COELHO, L. D. A.; SCHALCH, E. Concentrações Plasmáticas de Progesterona em Borregas Lanadas e Deslanadas no Período de Abril a Novembro, no Estado de São Paulo. Revista Brasileira de Zootecnia, Brasília, v. 31, n. 3, p. 1150-1156, 2001.

SILVA, C. M.; SERAKIDES, R.; NASCIMENTO, E. F.; NUNES, V. A., RIBEIRO, A. F.; OCARINO, N. M. Quantificação das regiões organizadoras de nucléolo (NORs) como parâmetro para avaliar a proliferação das células da granulosa. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 55, n .1, p. 113-116, 2003.

SIMPLICIO, A. A.; SALLES, H. O.; SANTOS, D. O. Transferência de embriões nos pequenos ruminantes domésticos. Revista Brasileira de Reprodução Animal, Belo Horizonte, v. Supl, n. 5, p. 17-27, 2002.

SISSON, S. Aparelho Urogenital do Ruminante. In: SISSON, S.; GROSSMAN, J.D. Anatomia dos animais domésticos. 5.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1986. v.1. p.879-895.

SOUZA, M. I. L.; URIBE-VELÁSQUEZ, L. F.; OBA, E. SÁ FILHO, O. G.; DE AMORIM RAMOS, A. Secreção de esteróides ovarianos, em ovelhas mestiças de raças exploradas para corte, em distintos momentos reprodutivos, no estado de São Paulo. Ciência Animal Brasileira, Goiania, v. 9, n. 4, p. 1107-1113, 2008.

TASENDE, C.; MEIKLE, A.; RODRÍGUEZ-PIÑÓN, M. FORSBERG, M.; GARÓFALO, E. G. Estrogen and progesterone receptor content in the pituitary gland and uterus of progesterone-primed and gonadotropin releasing hormone-treated anestrous ewes. Theriogenology, Milão, v. 57, n. 6, p.1719-1731, 2002.

TRALDI, A. S. Biotécnicas Aplicadas em Reprodução de Pequenos Ruminantes. In: FEIRA INTERNACIONAL DE CAPRINOS E OVINOS, 3. 2006, Pirassununga. Anais... Pirassununga: [s.n] 2006, p.1-11.

TRERÈ, D. AgNOR staining and quantification. Micron, Amsterdam, v. 31, n. 2, p. 127-131, 2000.

UNDERWOOD, J. C. AgNOR measurements as indices of proliferation, ploidy and prognosis. Clinical molecular pathology, Sydney, v. 48, n. 5, p. 239-240, 1995.

USLU, B. A.; TASAL, I.; GULYUZ, F.; SENDAG, S.; UCAR, O.; GOERICKE-PESCH, S. Effects of oestrus synchronisation using melatonin and norgestomet implants followed by eCG injection upon reproductive traits of fat-tailed Morkaraman ewes during suckling, anoestrus season Wehrend. Small Ruminant Research, Amsterdam, v. 108, n. 1, p. 102-106, 2012.

URIBE-VELASQUEZ, L. F.; OBA, E.; SOUZA, M. I. L. Efeitos da progesterona exógena sobre o desenvolvimento folicular em ovelhas. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 60, n. 1, p. 58-65, 2008.

VILARIÑO, M.; RUBIANES, E.; MENCHACA, A. Ovarian responses and pregnancy rate with previously used intravaginal progesterone releasing devices for fixed-time artificial insemination in sheep. Theriogenology, Milão, v. 79, n. 1, p. 206-210, 2013.

YOUNG, M. J.; MCNEILLY, A. S. Theca: the forgotten cell of the ovarian follicle. Reproduction, Nottingham v.140, n.4, p.489-504, 2010.